什么是基因工程?
基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。
基因工程是一种通过现代生物技术手段对生物基因进行改造和操作的生物工程技术。基因工程是一种重要的生物技术，它主要通过对生物体内部的基因进行人为操作，以达到改变生物性状的目的。
基因工程（geneticengineering），也叫基因操作、遗传工程，或重新组体DNA技术。它是一项将生物的某个基因通过基本载体运送到另一种生物的活性细胞中，并使之无性繁殖（称之为“克隆”）和行使正常功能（称之为“表达”），从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
基因工程也就是DNA重组技术。它是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物DNA分子进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新的生物类型。基因工程又称遗传工程。
基因工程的5个步骤
1、基因工程是有目的地在体外进行的一系列基因操作。一个完整的基因工程实验包括5个步骤：（1）获取目的基因；（2）获取基因载体；（3）重组DNA；（4）把重组DNA导入受体细胞进行扩增；（5）筛选与培育。这一流程只是基因工程的基本轮廓，远远不能包含基因工程的全部内容。
2、目的基因的分离或合成；将目的基因与载体DNA连接，构建重组DNA分子——表达载体；将重组DNA分子导入受体细胞，并获得具有外源基因的个体；转基因生物的检测与鉴定；转基因生物的安全性评价。基因工程特征 1）跨物种性 外源基因到另一种不同的生物细胞内进行繁殖。
3、基因工程载体的实施步骤：目的基因制备和分离；DNA重组体的构建；DNA重组体的扩增；重组体筛选和鉴定；基因表达及产物的分离纯化和鉴定。
4、基因工程的基本过程主要包括以下几个步骤：（1）目的基因的获得 目前获得目的基因的主要方式有：化学合成法和构建基因文库法。① 化学合成法 该方法适用于已知核苷酸序列且相对分子质量较小的目的基因的制备。
5、步骤：⑴用一定的限制酶切割质粒，使之出现一个黏性末端切口。⑵用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性末端。⑶将目的基因片段插入质粒切口，加入适量DNA连接酶，使目的基因与质粒形成重组质粒。⑷基因表达载体的构成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
高三基因工程最后一步检测与鉴定的详细过程
获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。在导人目的基因前，首先要获得目的基因即本题中的编码毒素蛋白的DNA序列，然后要将目的基因与运载体结合即与细菌质粒重组。
检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。或者用RNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验，来验证导入基因是否成功表达。
基因工程的操作程序涉及两个关键步骤：目的基因的检测与鉴定。首先，我们进行检测： 导入检测：目的是确认受体细胞的染色体DNA上是否成功插入了目的基因。这项技术通常使用DNA分子杂交法，也称为DNA探针法。通过将特异性的DNA探针与受体细胞的DNA进行配对，可以判断目的基因的存在与否。
⑴、检测：①、导入检测：检测受体细胞染色体DNA上是否含有目的基因。DNA分子杂交法（DNA探针法）。②、表达检测：检测目的基因是否完成转录出mRNA。分子杂交法检测RNA。检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。⑵、鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。
检测方法是：采用DNA分子杂交技术。先将转基因生物的基因组提取出来；把目的基因的DNA片段用放射性同位素作标记做成探针；使探针与基因组DNA杂交，如果出现杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。检测目的基因是否转录出了mRNA，这是检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。采用DNA与RNA分子杂交技术。
目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后，下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。 （4）目的基因的检测和表达：目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
简述基因工程操作的几个步骤
1、基因工程一般包括四个步骤：一是取得符合人们要求的DNA（）片段，这种DNA（）片段被称为“目的基因”；二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组 DNA；三是把重组DNA引入某种细胞；四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来。
2、转化的方法是利用一定浓度的氯化钙溶液处理细菌，使带有目的基因的重组质粒进入到宿主细胞中的过程。②转导 转导是指借助病毒、噬菌体或其他方法将外源DNA导入细胞并整合到宿主基因组上的方法。
3、基因工程操作步骤分为提取目的基因、基因表达载体构建、导入受体细胞和基因检测与表达四个阶段。首先，提取目的基因是关键。科学家们从植物的抗病基因（如抗病毒、抗细菌基因）、转基因荧光生物的储存蛋白基因，以及人类的胰岛素基因、干扰素基因等中，通过艰难的筛选，找到需要的基因。
4、进行基因操作一般要经历四个基本步骤，也就是基因操作的“四步曲”。提取目的基因 基因操作的第一步，是取得人们所需要的特定基因，也就是目的基因（如图）。
